Особенности иммунного статуса у пациентов с нарушением функции щитовидной железы экогенного характера

Обнаруженные изменения в содержании NSE и аАт к ней расширили пред­ставления о патогенезе поражения нервной системы при этих заболеваниях.

У больных ХАИТ показано изменение уровня эндотелина-1 и аАтк нему, что указывает на дисфункцию эндотелия при этих патологических со­стояниях.

В процессе исследования было выявлено, что традиционное медикамен­тозное лечение больных ХАИТ корригирует изменения в содержании тиреоидных гормонов, но не влияет на иммунологические сдвиги. Включе­ние же в комплексное лечение ХАИТ  иммуномодулятора полиоксидо­ния приводит к улучшению иммунологических показателей.

У больных ХАИТ, для коррекции иммунологических нарушений, рекомендуется использовать иммуномодулятор полиоксидоний (в дозе 6 мг

в/м через день в течение 5 дней, затем в той же дозе 1раз в 3дня), что позволит предотвратить прогрессирование заболеваний и возникновение осложнений.

Установлено,что

1.                 хронический аутоиммунный тиреоидит с различным функциональным со­стоянием щитовидной железы характеризуется увеличением числа CD3+,CD16+,CD56+и уменьшением содержания CD3+,HLA-DR+. У боль­ных хроническим аутоиммунным тиреоидитом с эутиреоидной функцией щитовидной железы увеличено число CD3-,CD19+, снижено содержание CD3+CD8+ и концентрация IgA, IgM и IgG. В группе больных с субклини­ческим гипотиреозом увеличено содержание CD3-,CD19+, снижено чис­ло CD3+,CD4+ и концентрация IgM, ау больных с манифестным гипотире­озом - CD3+CD8+. При этом увеличен уровень нейроспецифической ено-лазы,провоспалительныхцитокиновиэндотелина-1. Концентрация аутоан-тител к нейроспецифической енолазе повышена, а к эндотелину-1 и ИЛ-8 снижена.

2.                 включение в медикаментозное лечение иммуномодулятора полиоксидо-ния приводит к уменьшению числа CD3-,CD19+;CD3+,CD16+,CD56+; кон­центрации IgG; аутоантител к ТГ и ТПО у больных хроническим аутоиммунным тиреоидитом.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Характеристика обследованных групп. В работе с обследуемыми лицами соблюдались этические принципы, предъявляемые Хельсинской дек­ларацией Всемирной Медицинской Ассоциации (1964, 2000 ред). Исследование проводилось в следующих группах:

1.    контрольная включала 20 здоровых жителей Забайкалья в возрасте от 18 до 60 года (43,65±2,34).

2.    исследуемые группы - 54 больных ХАИТ (6 мужчин и 48 женщины), в возрасте от 28 до 60 лет (47,42±1,29) Больные ХАИТ с манифестным гипотиреозом находились на стацио­нарном лечении в эндокринологическом отделении ГУЗ "Краевая клиничес­кая больница" г. Читы. Пациенты с ХАИТ эутиреозом и субклиническим гипо­тиреозом наблюдались в амбулаторных условиях.

Среди больных ХАИТ было 14 человек в состоянии эутиреоза, 20 - с субклиническим гипотиреозом и 20 - с манифестным гипотиреозом. Диагноз ХАИТ был установлен на основании высокого содержания антитиреоидных аАт (Ат к ТПО, Ат к ТГ) в сыворотке крови и ультразвуковых изменений в щитовидной железе.

Все пациенты с ХАИТ были разделены на 2 группы:

1-я группа - больные, принимавшие традиционное медикаментозное ле­чение (n=20);

2-я группа - больные, принимавшие комплексное медикаментозное ле­чение (n=34) иммуномодулятором полиоксидонием.

Исключение составили больные с эутиреоидной функцией щитовидной железы, которым лечение L-Тироксином не проводилось.

Традиционное медикаментозное лечение больных гипотиреозом включа­ло L-Тироксин, который назначался утром за 30 мин до еды в дозе 50-150 мкг.

Пациентам с комплексным лечением дополнительно назначался полиоксидо-ний (6 мг в/м по схеме: 5 инъекций через день, затем 5 инъекций -1 раз в три дня) (ЛаринаВ.Н.,1999).

Критериями исключения из исследования являлись:

1.                 тяжелые соматические заболевания;

2.                 сопутствующая патология щитовидной железы;

3.                 дегенеративные заболевания центральной и периферической нервной сис­темы;

4.                 беременность;

5.                 лица младше 18 лет и старше 60 лет.

Лабораторные методы исследования.

Забор венозной крови прово­дили натощак в утренние часы.

Основные показатели иммунограммы определялись на проточном цито-метре EpicsXL-MCL с определением в двухпараметрическом анализе повер­хностных маркеров лейкоцитов B-cells (CD3-,CD19+); T-cells (CD3+,CD19-); T-helpers (CD3+,CD4+); T-суююх. (CD3+,CD8+); NK-cells (CD3+,CD16+,CD56+); T-NK-cells (CD3+,CD16+,CD56+); T-cellACTIV (CD3+,HLA-DR+); ИРИ - (CD4+/ CD8+); T-cells (CD3+)/B-cells (CD19+). Концентрация иммуноглобулинов клас­сов А, М, G определялась методом турбодиметрии; показатели тиреоидной панели, цитокинового профиля, NSE, эндотелина-1 изучались методом твердо­фазного иммуноферментного анализа. Уровень аАткИЛ-8, NSE, эндотелину-1 определяли оригинальным методом.

Статистическая обработка проводилась при помощи пакета программ BIOSTAT3.03.Так как распределение изучаемого признака в группах отлича­лось от нормального, сравнение групп по признаку проводилось непарамет­рическим методом. Данные представлены в виде: Ме - медиана, интерквар-тильного(процентильного)интервала(указанвскобках).При сравнении групп использовался критерий Манна-Уитни (U), различия считали значимыми при р<0,05.

РЕЗУЛЬТАТЫ             ИССЛЕДОВАНИЙ

1. Состояние иммунитета, цитокинового профиля, нейроспецифическойено-лазы, эндотелина-1 и аАт к ним у больных хроническим аутоиммунным тиреоидитом

1.1. Показатели клеточного и гуморального звеньев иммунитета у больных хроническим аутоиммунным тиреоидитом с различным функциональным состоянием щитовидной железы

Согласно полученным результатам нашего исследования у всех обсле­дуемых больных увеличивалось относительное и абсолютное число T-NK-cells (CD3+,CD16+,CD56) и уменьшалось содержание T-cells ACTIV (CD3+,HLA-DR+). При этом относительное содержание T-helpers (CD3+,CD4+) было сниженным в группе пациентов с субклиническим гипо­тиреозом (p=0,014), по сравнению с показателями здоровых лиц, и не меня­лось в группах с эутиреозом и манифестным гипотиреозом. В группах боль­ных ХАИТ с эутиреоидной функцией и манифестным гипотиреозом наблюда­лось уменьшение относительного числа T-cytotox. (CD3+,CD8+). По нашим данным при ХАИТ с эутиреоидной функцией щитовидной железы повыша­лось абсолютное содержание, а при субклиническом гипотиреозе абсолют­ное и относительное число B-cells (CD3-,CD19+). В то же время у пациентов с субклиническим гипотиреозом наблюдалось уменьшение соотношения CD4+/CD8+ как в абсолютном, так и в относительном эквиваленте, а в груп­пах с эутиреозом и субклиническим гипотиреозом и абсолютное соотноше­ние T-cells (CD3+)/B-cells (CD19+). У больных ХАИТ не зависимо от функцио­нального состояния щитовидной железы не менялось относительное и абсо­лютное общее содержание лимфоцитов, Т-лимфоцитов (CD3+,CD19-) иNK-cells(CD3-,CD16+,CD56+).

Также было выявлено снижение концентрации IgА, IgM и IgG (р<0,05) у больных ХАИТ с эутиреозом, а в группе с субклиническим гипотиреозом на­блюдалось уменьшение содержания IgM (р<0,05).

Таким образом, полученные нами данные свидетельствуют в пользу дис-регуляции клеточного иммунитета у больных ХАИТ с различным функцио­нальным состоянием щитовидной железы. При этом следует отметить, что у всех больных увеличивалось количество Т-NK-cells (CD3+,CD16+,CD56+) иснижалось число T-cellsACTIV(CD3+,HLA-DR+). Увеличение числа Т-NK-cells (CD3+,CD16+,CD56+) приводит к усилению аутоиммунного процесса, что способствует развитию деструктивных изменений в щитовидной железе и прогрессирующему снижению продукции тиреоидных гормонов. Уменьше­ние содержания T-cells ACTIV (CD3+,HLA-DR+), возможно связано с пере­распределением их из свободного кровотока в зону аутоиммунного процесса

в щитовидной железе. Снижение относительного числа T-cytotox. (CD3+,CD8+) у больных с эутиреоидной функцией и субклиническим гипотиреозом совпа­дает с основной концепцией развития ХАИТ, выдвинутой R. Volpe (2001). В противовес литературным данным, нами выявлено уменьшение концентра­ции IgG у больных ХАИТ с эутиреозом и отсутствие его увеличения в осталь­ных группах больных. Как известно, IgG представлен 4 подклассами: IgG1, IgG2, IgG3 и IgG4. В публикациях описано, что аАт к ТПО с различными формами гипотиреоза представлены в основном IgG1 и IgG4. Однако по мере прогресси-рования гипотиреоза доля IgG1 возрастает по сравнению с остальными под­классами. В нашем исследовании определялась общая концентрация IgG, по­этому судить об уменьшении или увеличении содержания подклассов IgG1 и IgG4мынеможем.

1.2.              Содержание цитокинов в сыворотке крови у больных хроничес­
ким аутоиммунным тиреоидитом с различным функциональным
состоянием щитовидной железы

В нашей работе обращает на себя внимание увеличение концентрации ИНФ-у у больных ХАИТ с эутиреоидной функцией в 14 раз (p=0,035), суб­клиническим гипотиреозом в 7 раз (p=0,005) и манифестным гипотиреозом в 36,7 раза (p=0,004). Одновременно с этим наблюдалось значительное повы­шение содержания ИНФ-а у больных ХАИТ с субклиническим гипотирео­зом (p=0,022) и манифестным гипотиреозом (p=0,043). Кроме этого во всех группах регистрировалось увеличение уровня ИЛ-8 и ИЛ-6. Несмотря науве-личение содержания ИЛ-8, концентрация аАт к ИЛ-8 у пациентов с ХАИТ с субклиническим и манифестным гипотиреозом уменьшалась (р=0,004), а у больных ХАИТ с эутиреозом не менялась (таблица 1).

Полученные данные свидетельствуют о значительном изменении цито-кинового профиля у больных ХАИТ, что не может не свидетельствовать в пользу участия этих пептидов в патогенезе данного заболевания.

1.3.              Уровень нейроспецифической енолазы и аАт к ней у больных
хроническим аутоиммунным тиреоидитом с различным функ­
циональным состоянием щитовидной железы

У больных ХАИТ независимо от функционального состояния щитовид­ной железы концентрация NSE увеличилась практически в 5 раз по сравнению сгруппойконтроля.ПриэтомуровеньаАткNSEувеличилсяв2разавгруппе больных с эутиреоидной функцией (p=0,024). У пациентов с манифестным гипотиреозом также наблюдался рост аАт, не выявленный в группе больных с субклиническим гипотиреозом (таблица 2).

Таблица 1 Содержание цитокинов в сыворотке крови у больных ХАИТ (Ме (25-й;75-й))

Примечание: p - значение различий по отношению к здоровым; p1 - значение различий между больными ХАИТсэутиреоидной функциейибольными ХАИТссубклиничес-ким гипотиреозом; p2 - значение различий между больными ХАИТ с эутиреоидной функцией и больными ХАИТ с манифестным гипотиреозом; p3 - значение различий между больными ХАИТ с субклиническим гипотиреозом и больными ХАИТ с мани­фестным гипотиреозом; * - указаны случаи значимых различий.

Полученные нами данные, вероятно, свидетельствуют о структурном по­вреждении клеток нервной системы, что вносит новые представления о патоге­незе поражения нервной системы при данной патологии.

Уровень NSE и аАт к ней у больных ХАИТ (Ме(25-й;75-й))

Таблица 2