Отчет по производственной практике в ООО « Молоко»

Работа  с агрессивными веществами: 

 

        При неумелом или  небрежном обращении с концентрированными кислотами (серной, соляной и пр.), каустической содой (едким нитратом) и лабораторным стеклом, могут произойти  несчастные случаи. Поэтому работники лаборатории должны пройти вводный и повторный инструктаж и освоить безопасные методы, работы.

        Бутылки с серной кислотой и крепкими растворами каустической соды следует держать закрытыми  в прочных корзинах или футлярах в изолированных помещениях. Для их переливания нужно пользоваться сифоном или приспособлениями для накопления больших бутылей. Работать надо при этом в резиновых перчатках и предохранительных очках.

        При перевозке кислоты, для проведения анализов молока в  других пунктах, ее упаковывают в закрывающийся ящик с гнездами.

        Серную кислоту  разрешается разводить только опытному старшему лаборанту. При разведении пользуются толстостенной посудой, переливая тонкой струей кислоту  в воду. При соединении серной кислоты  с водой происходит сильное нагревание. Кислоту и изоамиловый спирт можно отмеривать только автоматической пипеткой, дозатором.

        Центрифуга для  определения жира, должна быть установлена  по уровню, прочно укреплена и снабжена защитным кожухом. При отсчетах показания  жиромера надо надевать предохранительные очки или же применять экран из органического стекла, который помещается перед жиромером. Жиромер необходимо завертывать в полотенце. Держать его следует за корпус (расширенная часть). Нельзя применять больших усилий при ввертывании пробок, они должны быть эластичными. При перемешивании содержимого в жиромерах, в штативе сначала на них накладывают полотенце, а затем надевают футляр (защитный кожух).

        Отработанную кислоту  сливают в стерильную бутыль, находящуюся  в отраженном месте. По мере наполнения ее выливают в отдельную яму, выливать в общую канализацию не разрешается. 

 

        При добавлении каустической соды, надо не допускать ее рассыпания, осторожно высыпать в воду. Работать следует в халате, предохранительных очках, с закрытой головой.

        Хлорная известь  вследствие выделения хлора вызывает удушье. Следует избегать ее распыления, осторожно высыпать в воду. Работать при этом надо в противогазе, или надевать влажную марлевую повязку.

        Сильнодействующие вещества могут находиться в лаборатории в количестве не более двух суточной потребности. В помещениях, где производится работа с кислотами и щелочами, должна быть вода и запасы слабых растворов питьевой соды, уксусной, борной кислот. Вход в лабораторию посторонним запрещен.

Работа в боксе.

     Посевы  производят в боксе. Бокс комплектуется  из 2 отделений, собственно бокса и  предбоксника.

     Предбоксник служит для одевания специальной  одежды ( халаты, колпаки) и вспомогательных  работ. Бокс должен быть оборудован бактерицидными лампами, количество которых определяют из расчета мощности облучения 2,5 Вт/м -¹.

     При определении редуктазной пробы, а также при отсутствии специального бокса допускается проведение анализов в лабораторной комнате. Ежедневно после окончания работ помещение боксов моют горячей водой с мылом или порошком и протирают досуха. 1 раз в неделю проводят дезинфицирующими препаратами по соответствующей для каждого препарата инструкции.

Приготовление раствора сычужного фермента.

     0,5 г сычужного порошка растворяют  в 100 см³ воды, нагретой до 30 +1 градус С.

     Приготовление раствора метилового голубого для окрашивания  препаратов.

К   30 см     основного     спиртового     раствора     метилового       голубого 

 

прибавляют 100 см "дистиллированной воды и 1 см³раствора гидроксила калия с массовой концентрацией 10 с/дм³

Приготовление водного раствора пептона с массовой долей пептона 3%

     3 г пептона помещают в колбу  и доливают до 100 см³питьевой водой, стерилизуют при температуре 121 градус С в течении 10 минут и хранят в холодильнике при 6-8 градусе С в течении 30 суток. В случае отсутствия автоклава допускается кипячения раствора пептона в течении 1-2 минут на слабом огне. Данный раствор должен быть использован в течении 7-8 часов.

     Всю новую посуду, предназначенную для  бактериологических работ, кипятят в подкисленной воде в течении 15 минут, а затем ополаскивают дистиллированной водой.

     Посуда  с питательными средами после  подсчета на них кишечных палочек, дрожжей, плесеней, и масляннокислых бактерий, обеззараживается перед мойкой путем  стерилизации в автоклаве при 120 градусов С в течении 30 минут или кипятят в течении 1 часа.

1. Вымытую посуду стерилизуют в сушильном шкафу при 160 градусов в течении 2 часов или в автоклаве при 121 градусу С в течении 30 минут.
2. Чашки Петри, пепетки, стерилизуют завернутыми в бумагу или металлических пеналах. В коней пипетки предварительно вкладывают кусочек ваты. Резиновые пробки стерилизуют в автоклаве завернутыми в бумагу. Стерильную посуду хранят в плотно закрывающихся шкафах. Срок хранения стерильной посуды не более 30 суток.
3. Изготовленные ватные или марлевые тампоны стерилизуют каждый в определенности завернутыми в бумагу. Отдельно стерилизуют пробирки с 4 см ³ раствора хлористого натрия при температуре 121 градус С в течении 20 минут. Тампон должен быть закреплен на проволоке или деревянной палочке, пропущенной через ватную пробку. В этом случае его вместе с пробкой вставляют в пробирку с 4 см³раствора хлористого натрия или 5 см³среды Кесслера.
4. Температура     внутри   автоклава   и    давление     связаны   жесткой

 

 

зависимостью. Поэтому для контроля работы автоклава  необходимо и достаточно иметь проверенный  в территориальных органах Госстандарта манометр, класса не выше 1,5 который должен ежегодно проводить проверку в органах Госстандарта.

   2. Подготовка лабораторной посуды и боксовых 
принадлежностей к стерилизации. Обращение с

лабораторной  посудой.

        Стеклянные предметы, употребляемые в лаборатории, материалы, а также приготовленные питательные  среды необходимо стерилизовать. Этот процесс осуществляется в стерилизационных аппаратах, которые разделяют по способам нагревания материалов:

• Стерилизатор, обогреваемый сухим жаром. В них можно обрабатывать стеклянные предметы, бумагу, вату, крахмал, мел, но нельзя стерилизовать жидкие среды и влажные материалы.
• Автоклав, или стерилизатор, обогреваемый паром под давлением. В нем стерилизуют питательные среды, различные жидкости и посуду.

        Стерилизатор загружают  в не нагретом состоянии. Материал тщательно  завертывают в бумагу. Посуда должна быть сухой, горлышки колб и пробирок закрывают ватными пробками и укладывают в аппарат так, чтобы она не касалась стенок. Продолжительность стерилизации при температуре 160-170 С составляет 2 часа (время отмечают с момента, когда температура внутри стерилизатора достигнет 160 С).

        Простериллизованный материал выгружают из шкафа после того, как она остынет. Показателем достаточной степени стерилизации служит легкое побурение бумаги, в которую завернут материал. При пониженной температуре цвет ее не изменяется, а при более высокой (свыше 170С) она становится бурой и даже обугливается.

3. Знакомство с микроскопическими методами

микробиологического контроля. 

 

Приготовление препаратов микроорганизмов: подготовка предметных и

                      покровных стекол. Неокрашенные   препараты.   Приготавливают   в   тех   случаях,   когда микробов просматривают в живом состоянии и когда требуется определенная подвижность, их способы размножения и т.д. Приготавливают препарат одним из следующих способов:

        - Раздавленная капля. На чистое предметное стекло наносят каплю воды. 
Капля должна быть средней величины и заполнять все пространство между 
предметным и покровным стеклом. Или физиологического раствора (0,85% 
раствор Na C1). В каплю вносят иглой небольшое количество культуры 
исследуемого микроба и тщательно перемешивают. Если исследуют жидкую 
культуру, то ее берут и наносят непосредственно на стекло (без капли воды).

        К недостаткам данного  метода относится быстрое высыхание  жидкости в препарате, вследствие чего микробы теряют свою подвижность.

        - Висячая капля. При этом, используют предметное стекло со 
специально вышлифованным углублением посредине края, которого смазывают 
вазелином. Препарат приготавливают на середине покровного стекла. Затем 
предметное стекло переворачивают углублением вниз и прикладывают к 
покровному стеклу, так чтобы капля находилась посредине углубления (она не 
должна касаться его дна). После этого препарат переворачивают покровным 
стеклом вверх. Вазелин плотно приклеивает покровное стекло к предметному, 
благодаря чему капля не высыхает, создается влажная камера.

             Приготовление препаратов живых  клеток. Для определения формы микроорганизмов, способности к спорообразованию, подвижности достаточно исследовать их в живом состоянии. Для этого на чистое предметное стекло наносят небольшую каплю водопроводной воды, предварительная стерилизация этой воды излишне, т.к микрофлора естественной питьевой воды ничтожна по сравнению с вносимой. Дистиллированную воду брать не рекомендуется, т.к в ней нет необходимой для 

 

развития   микроорганизмов   концентрации   солей,  вследствие   чего   возможно изменение формы клеток, потеря ими способности к движению и т.д.

        В каплю воды вносят иглой небольшое количество исследуемых  микроорганизмов, тщательно размешивают  и полученную суспензию покрывают  покровным стеклом. При этом, не следует применять обычных мер предосторожности от бактериального обсеменения. Воду берут из - под крана, стекла могут быть не стерильными, но обязательно чистыми, чтобы на них не было большого количества микроорганизмов от предыдущего аппарата.

        Жидкие культуры (например, в бульоне) разводить в воде не надо. Берется капля зараженного бульона, наносится петлей на предметное стекло и покрывается покровным стеклом. Приготовленный препарат рассматривается под микроскопом с сухой системой и самым большим увеличением объектива и с 3-м или 4-м окуляром.

        Подвижность микробов лучше наблюдать в суточных бульонных  культурах, взятых с плотных питательных сред. При наблюдении надо различать активную подвижность микробов (т.е микроорганизмы пробегают через поле зрения во всевозможных направлениях); пассивную, т.е с током жидкости (при этом все клетки в поле зрения движутся в одном направлении) и молекулярное броуновское движение, которое можно характеризовать, как беспорядочную «толкотню» микробов около одних и тех же точек равновесия.

        Споры в водном препарате  резко очерчены, сильно преломляют свет и кажутся блестящими или  же темными (если будут находиться в  фокусе). При рассматривании вегетативных кокковых форм эти признаки не наблюдаются.

                  Окрашивание микроорганизмов. Чтобы    рассмотреть    детали    строения    клеток,    особенно    мелких микроорганизмов, или проверить чистоту культуры, препараты окрашивают.

        Простое окрашивание. Окраска микробов состоит из следующих операций:

Приготовление  мазка.   На  чистое,  хорошо  обезжиренное  стекло  наносят каплю   воды   и   небольшое   количество исследуемого материала (материалы

 

берут предварительно прокаленной иглой). Все тщательно перемешивают и  равномерно размазывают по стеклу на площади 2-3 см. Мазок следует готовить более тонким - это облегчает изучение отдельных клеток.