Бруцеллез

   В своей работе Д.В.Н. Ощепков В.Г. засвидетельствовал: «…  Исследования по изысканию методов дифференциации больных животных от привитых вакциной из штамма 19, проведенные совместно с А.А. Новицким не дали положительных результатов».

      Вместе с тем в искусственно созданном очаге инфекции защитные свойства вакцины из штамма 19 проявились весьма демонстративно. По данным Г.Н. Глотова (1968),  в эпизоотическом опыте противостояло заражению 83-94% овец.

      СибНИВИ и ВИЭВ было поставлено в общей сложности 11 опытов по выяснению различных вопросов, связанных с оптимизацией схемы иммунизации.

          Характер течения бруцеллеза определяется условиями взаимодействия макро- и микроорганизма, включающие физиологический статус и вид животного, уровень защитных сил, в т.ч. иммунологической настроенности, величину дозы возбудителя, его вирулентности и механизма заражения. Развитие инфекционного процесса бруцеллеза имеет четыре стадии.

          Первая стадия адаптации соответствует самому раннему периоду инфекции. Характеризуется тем, что попавший в организм возбудитель фагоцитируется макрофагами и оседает в регионарных  лимфатических узлах,  образуя своеобразное депо. Эта стадия бруцеллезной инфекции, как правило, выпадает из поля зрения  диагностов, поскольку организм хозяина не проявляет каких либо заметных реакций гуморального и клеточного характера.

          Во второй стадии, осевшие в регионарных лимфатических узлах  бруцеллы, начинают размножаться (регионарная инфекция). В этот период происходит иммуноаллергическая перестройка организма, которую можно характеризовать как стадию иммунизации. Возбудитель можно выделить при бактериологическом исследовании. При наличии достаточного иммунитета, слабой вирулентности, малой дозы возбудителя, отсутствии беременности и лактации инфекционный процесс завершается на этих двух стадиях.

          Третья стадия характеризуется генерализацией процесса, при которой наблюдаются типичные признаки бруцеллеза. Эта стадия развития, когда регионарная лимфатическая система не в состояние купировать инфекционный процесс, наблюдается незавершенный фагоцитоз, бруцеллы размножаются в фагоцитах, прорывают первичный  лимфатический барьер и стоком крови и лимфы устремляются в ткани, паренхиматозные органы, костный мозг, отдаленные лимфатические железы. В этот период происходит частичная гибель бруцелл с выделением эндотоксина, что обуславливает проявление клинических форм бруцеллеза. В этой стадии бруцеллез диагностируется  всеми доступными методами: серологическим, аллергическим, бактериологическим.

          По мере затухания инфекционного процесса, его хронизации наступает четвертая стадия - вторичной латенции (переболевание). Эта стадия характеризуется слабым синтезом гуморальных антител с сохранением выраженной аллергической настроенности. Возбудитель у части животных элиминирует. А у некоторых локализуется в отдельных органах и лимфатических узлах, персистируя неопределенно длительное время.

          При попадании в организм слабовирулентных, в частности, вакцинных культур бруцелл наблюдаются доброкачественные изменения. При  заражении вирулентными культурами в не иммунном  организме развиваются тяжелые деструктивные поражения. Развиваются резорбтивно-воспалительные процессы: набухание, слущивание эпителия, появление серозного или фибринозного экссудата. Наблюдается скопление макрофагов. В последующем происходит диффузная гиперплазия клеток РЭС с образованием характерных бруцеллезных гранулем  и очагов некроза  в печени, селезенке. Выраженный тропизм бруцелл к расселению в матке связан с выработкой котиледонами соответствующих ферментов, способствующих размножению бруцелл. Продукты метаболизма бруцелл вызывают воспалительные процессы в матке, котиледонов вплоть до некрозов. В результате нарушается связь между слизистой оболочки матки  и хорионом, прекращается питание плода, что ведет к прерыванию беременности и выкидышу.

          Течение и клиническое проявление бруцеллеза. Инкубационный период при бруцеллезе продолжается 2-4 недели. У большинства животных бруцеллез протекает бессимптомно. Основной клинический признак у с/х животных  аборт во второй половине беременности. Как следствие воспалительных процессов в матке бруцеллез сопровождается рождением нежизнеспособного потомства, задержанием последа, эндометритом. У самцов иногда регистрируют орхиты, эпидидимиты. Через 2-4 недели после заражения в крови появляются агглютинины, затем комплементсвязывающие антитела, несколько позднее аллергическая настроенность. Клиническим показателем бруцеллеза могут быть маститы, артриты, гигромы, бурситы. Однако при современных методах диагностике и профилактике животные с такими клиническими признаками встречаются редко.

          Патологоанатомические изменения  при бруцеллезе локализуются в основном в половых органах (плацентит, различные формы метрита и эндометрита, орхиты, эпидидимиты), не имеют характерных особенностей и в диагностике бруцеллеза существенной роли не играют.

       После переболевания бруцеллезом или после профилактической иммунизации у животных формируется иммунитет. Состояние  невосприимчивости к повторному заражению обычно наступает через 3-4 недели после поступления антигена и продолжается как в период носительства, так и некоторое время  после элиминации бруцелл. Переход инфекционного (нестерильного) в постинфекционный (стерильный) иммунитет наступает постепенно  и соответствует периоду угасания инфекции.

        На основе изучения иммунитета при бруцеллезе разработана специфическая профилактика этой болезни, проводимая в неблагополучных регионах России и являющаяся основным фактором управления эпизоотическим процессом.

        Д.в.н. А.А.Новицкий в своей работе  «Изыскание новых средств,  специфической профилактики» разработал и предложил: «… четыре схемы специфической профилактики бруцеллёза крупного рогатого скота с применением вакцин из штамма 19 и штамма 82 на молодняке и коровах в определённые сроки».

   6. Диагностика бруцеллёза. Одной из составляющей специфической профилактики   бруцеллеза, является диагностика, которая  включает клинический, бактериологический, биологический, серологический, аллергический и в последнее время генодиагностический методы исследования. Методологически диагностика регламентирована санитарными правилами (СП 3.1.085-96), ветеринарными правилами (ВП 13.3.1302-96) по профилактике и борьбе с заразными болезнями животных и наставлением по диагностике бруцеллеза животных, утвержденным ДВ МСХ России 27.03.00. В своих работах «Эпизоотология и меры борьбы с инфекционными болезнями животных.– Новосибирск, 1985» .д.в.н. И.А.Косилов пишет: «… такие вспомогательные к основным  методам диагностики бруцеллёза, как радиоиммунологический, иммуноферментный, реакция иммунофлюоресценции, позволили нам более подробно изучить иммуногенные свойства некоторых противобруцеллезных вакцин».

    Бактериологический и биологический методы исследования являются самыми точными, поскольку позволяют выделить возбудителя непосредственно из патологического материала. Для бактериологического исследования обычно обтирают содержимое желудка, печень и селезенку абортированного плода, котиледоны, кусочки плаценты или органы (паренхиматозные, половые, лимфатические узлы) от убитых животных. Срок доставки материала в лабораторию не должен превышать одни сутки. Одновременно для серологического исследования направляют кровь и молоко от подозреваемого в заражение животного.   При этом оформляют необходимые сопроводительные документы с указанием сведений о животном и его владельце.

           Бактериологическая диагностика включает микроскопию мазков из патологического материала, выделение культуры путем высева материала на питательные среды и биологическую пробу на лабораторных животных. Бруцеллы окрашиваются всеми анилиновыми красками. При дифференциальной окраске наиболее часто используют метод Козловского. Диагностическая ценность микроскопического метода из-за полиморфизма бруцелл весьма относительна.

          Биологическая проба значительно повышает чувствительность бактериологического метода, поскольку диагноз на бруцеллез можно поставить не только по выделению от зараженных животных чистой культуры, но и по результатам их серологического исследования. Появления антител в крови морской свинки к бруцеллезному антигену в диагностических титрах (РА 10 МЕ и выше) свидетельствует о заболевании бруцеллезом.

          Серологическая диагностика бруцеллеза наиболее широко применяется в ветеринарии, основана на обнаружение специфических антител в сыворотке крови. Животных разных видов исследуют серологическими методами в плановом порядке при контроле благополучия, при подозрении в заражении бруцеллезом и при оздоровлении стад, отар, групп животных от этой болезни.

         Реакция агглютинации (РА) ставится в основном пробирочным методом. В основе реакции прямое взаимодействие антигена с антителами – агглютининами, циркулирующими в крови. Реакция оценивается в международных единицах (МЕ) при каждом разведении сыворотки. Преимущественно реакции в возможности раннего (7-15 дней) выявления антител у зараженных животных. Недостатком РА является непостоянство показателей, а также случаи неспецифического реагирования с сыворотками животных, инфицированных возбудителями, имеющими антигенное родство с бруцеллами.

         Роз бенгал проба (РБП) экспресс-метод диагностики бруцеллеза. В основе реакции взаимодействие в кислой среде окрашенного бенгальским розовым высококонцентрированного бруцеллезного антигена с агглютининами сыворотки крови на пластине. Для окончательного диагноза положительный результат  РБП должен быть подтвержден результатами РА, РСК.

          Реакция связывания комплимента (РСК) или ее модификация реакция длительного связывания комплимента (РДСК), являются более надежными и стабильными и в значительной мере восполняют недостатки РА. Реакция основана на взаимодействии в пробирке антигена с антителами в присутствии комплемента.

          Кольцевая реакция с молоком (КР) основана на взаимодействие в пробирке специфических антител, содержащихся в молоке с цветным бруцеллезным антигеном. Реакция оценивается визуально по степени выраженности кольца в верхней части столбика молока слое сливок. Преимущественно реакции в возможности выявлять секреторный иммуноглобулин класса «А» и тем самым дополнять показатели РА, РСК.

         Реакция иммунодифузии с О-полисахаридным антигеном (РИД) основана на взаимодействии в агаровом геле О-ПС антигена бруцелл со специфическим и к нему антителами, циркулирующим в крови больных бруцеллезом животных. РИД с О-ПС антигеном используется при контроле благополучия стад, при дифференциации неспецифических реакций, вызванных гетерологичными антигенами. Особенно ценными является применение РИД для дифференциальной эпизоотической оценки стад, в которых применяют противобруцеллезные вакцины.

          Аллергичекая диагностика – специфический метод, основанный на клеточных иммунных реакциях. Регламентирован при диагностике бруцеллеза свиней. В качестве аллергена используют бруцеллин ВИЭВ, который водят внутрикожно в дозе0,2-0,3 мл с внешней стороны основания уха. Реакцию учитывают через 48-72 часа. При положительной реакции (воспалительный отек) животных исследуют РСК.

          Молекулярно-генетическая диагностика бруцеллеза основана на обнаружении ДНК бруцелл в биологическом материале с помощью полимеразно-цепной реакции (ПЦР). Положительный результат ПЦР, зарегистрированный при исследовании хотя бы одной пробы материала свидетельствует о заражении животного бруцеллезом.

Примечание: Во всех случаях диагноз считается установленным при выделении культуры бруцелл или положительной биопробе.

          У крупного рогатого скота, иммунизированного противобруцеллезной вакциной из штамма 82, диагноз считается установленным при наличии РА 400 МЕ или РСК (РДСК) 1:20, или положительной РИД.

          У овец, привитых противобруцеллезными вакцинами, диагноз ставится при наличии у баранов – производителей, баранов – пробников или у ярок РА 100 МЕ и выше или РСК 1:5 и выше.

    После переболевания бруцеллезом или после профилактической иммунизации у животных формируется иммунитет. Состояние  невосприимчивости к повторному заражению обычно наступает через 3-4 недели после поступления антигена и продолжается как в период носительства, так и некоторое время  после элиминации бруцелл. Переход инфекционного (нестерильного) в постинфекционный (стерильный) иммунитет наступает постепенно  и соответствует периоду угасания инфекции.

          На основе изучения иммунитета при бруцеллезе разработана специфическая профилактика этой болезни, проводимая в неблагополучных регионах России и являющаяся основным фактором управления эпизоотическим процессом.

         Плановые профилактические мероприятия являются защитой восприимчивых животных. Для этого осуществляется строгий ветеринарный контроль  перемещения животных, проводится строительство санитарных пропускников, дезбарьеров, огораживание территорий ферм, регулярная дезинфекция и плановые диагностические исследования, а при необходимости профилактическая иммунизация.

  7. Эпизоотология и специфическая профилактика при бруцеллезе овец. При бруцеллезе мелкого рогатого скота решающая роль специфической профилактики в системе противоэпизоотических мероприятий   не подлежит сомнению. При этом  ее  эффективность  напрямую зависит  от создания и поддержания у восприимчивых животных неблагополучных и угрожаемых отар непрерывного и напряженного иммунитета на весь период неблагополучия и угрозы.

Изменение социальных и экономических условий в стране привело к реструктуризации животноводства, в том числе овцеводства и козоводства, и, как следствие – к невозможности, по экономическим и техническим причинам, осуществлять планомерную поотарную замену поголовья.