Бруцеллез

Поводом к испытанию аллергического метода послужили сообщения некоторых исследователей о кратковременном аллергическом состоянии у крупного рогатого скота после прививки вакциной из бруцелл штамма 19 (О.И. Морякова, 1957; Н.И. Федотов, 1958; К.Д. Дарвишев, 1961; В.Т. Котов, 1964, 1965; S. Woloszyn, 1960-1962). Авторы предлагали использовать этот феномен в практических целях, но материалов, подтверждающих пригодность этого метода дифференциации, приводили недостаточно.

Исследования подтверждали высокую чувствительность и специфичность аллергена, что вызвало интерес к изучению аллергической настроенности у животных после введения вакцинных штаммов бруцелл.

Исследования проведенные на молодняке, иммунизированном вакциной из штамма 19. показали, что вакцинация их в 4-8 месячном возрасте довольно слабо индуцирует аллергическую настроенность, которая проявлялась всего лишь у 2 % телок в течение 6-9 месяцев после вакцинации.

У телок, привитых в старшем возрасте, состояние аллергии было несколько более выраженным. Так максимальное количество реагирующих на аллерген наблюдали через 4 месяца после иммунизации телок в 18-20 месячном возрасте, а к 1,5 годам реакции не наблюдали.

Наиболее демонстративной была аллергическая настроенность у коров, привитых во взрослом состоянии,  когда только через 39 месяцев реагирующих на аллерген уже не регистрировали. Подобная зависимость наблюдалась и в проявлении серологических реакций, с той лишь разницей, что эти реакции регистрировали у большего количества животных и более продолжительное время.

Влияние беременности не только в период вакцинации, но и в период исследования является стимулирующим фактором в формировании аллергической настроенности.

Из специфических факторов, оказывающих влияние на аллергическую настроенность животных, особое значение имела кратность антигенных раздражений.

Реиммунизация коров более существенно отразилась на проявлении аллергической настроенности. На показатели серологических реакций все перечисленные факторы также оказывали подобное влияние, но еще в большей степени.

Установив особенности проявления аллергической настроенности у здоровых животных на введение противобруцеллезных вакцин, были проведены испытания аллергического метода в производственных условиях в стадах крупного рогатого скота с различным эпизоотическим состоянием.

Данные показали, что определение инфицированности вакцинированных животных этим методом более эффективно, чем серологическим. Экспериментальные данные об особенностях проявления поствакцинальной и постинфекционной аллергии у крупного рогатого скота позволили сформировать мнение о том, что наиболее оптимальным условием практического применения аллергической пробы является исследование телок через 10-12 месяцев после их вакцинации в 3-6-месячном возрасте, т.е. перед случкой или перед реимммунизацией. В своей работе «Аллергическая проба, как метод эпизоотической оценки крупного рогатого скота привитого бруцеллёзной вакциной из штамма 19» в 1970г. А.А. Новицкий пишет: «…к этому времени здоровые животные полностью утрачивают поствакцинальную аллергическую настроенность, а в случае инфицирования приобретают ее в достаточной степени». Дальнейшая производственная проверка в полной мере подтвердила это положение.

Так, исследование перед случкой (перед ревакцинацией) здоровых телок, привитых в 3-5-месячном возрасте вакциной из штамма 19, ни в одном случае не показало аллергической настроенности. В тоже время в гуртах телок, полученных от коров неблагополучных стад и выращенных в неблагополучных эпизоотических условиях, как правило, в аналогичные периоды исследования выделяли реагирующих животных от 5 до 20 % .

Хотя в последующем аллергическая диагностика бруцеллеза у крупного рогатого скота не нашла должного применения в ветеринарной практике из-за смены вакцинных штаммов, однако полученный материал позволил раскрыть особенности иммунного ответа животных на заражение штаммами с различной степенью вирулентности (вакцинные, заражающие, эпизоотические).

Заслуживают внимания сообщения об испытании других методов диагностики бруцеллеза для выявления больных в стадах, где животные привиты вакциной из штамма 19.

Ф.П. Локтева (1967) предлагала применять РА с сывороткой молока, Амерлаут (F.E. Amerlaut, 1962), Хиль (W.K.W. Hill, 1963, 1964), К.Т. Мирошниченко (1966), Г.А. Аршакуни (1966-1967), М.М. Иванов (1967) – РА с сывороткой крови, инактивированной при температуре 64о С в течение 30 минут.

Но материалов, подтверждающих практическую пригодность этих методов в целях дифференциации, авторы приводили недостаточно. Результаты, полученные при изучении аллергической пробы, а также РА с сывороткой молока, более объективно отражали эпизоотическое состояние стад, чем описанные серологические методы с сыворотками крови. В инфицированных стадах реакция аллергии и РА с сывороткой молока проявлялись в зависимости от степени неблагополучия, доходя в стадах естественного течения бруцеллеза соответственно до 22,1 и 41,5 %. К недостатку РА с сывороткой молока следует отнести невозможность ее применения на не лактирующих животных, а также влияние физиологического состояния и кратности введения антигенов на ее показатели. В результате в благополучных стадах у определенного процента глубокостельных и многократно привитых коров эта реакция регистрируется в позитивных титрах.

Негативные свойства вакцины из штамма 19, связанные с ее высокой агглютиногенностью, побудило многих исследователей к изысканию вакцины, полностью лишенной этого недостатка.

К этому времени многие исследователи уже располагали материалами по результатам изыскания и испытания вакцин со слабыми агглютиногенными свойствами.

Первые наиболее глубокие исследования в нашей стране провел в этом направлении П.А. Триленко, который в 1967-1970 гг. сконструировал для иммунизации крупного рогатого скота вакцины из штамма B. abortus 16 и 16/4.

Тщательная работа с этими штаммами позволила автору удерживать их в стабильной R-форме и считать их минус-вариантами, в локусе которых нет поверхностного оболочечного S-антигена. Применение этой вакцины в Белоруссии и Алма-Атинской области способствовало их оздоровлению от бруцеллеза крупного рогатого скота. Однако при последующих экспериментальных проверках эти штаммы показали невысокую иммуногенность и более того, мнение о их генетической стабильности не подтвердилось. При длительном культивировании были обнаружены сдвиги антигенной структуры штаммов в сторону S-форм бруцелл.

Интересные результаты по изысканию и испытанию вакцины такого рода были получены и другими исследователями. В частности, в ВИЭВ Е.С. Орловым (1966) был селекционирован из вакцинного штамма 19 инагглютиногенный штамм B. abortus 1 (В-1), обеспечивший у морских свинок иммунитет достаточной напряженности при отсутствии у привитых животных антител к S-антигену. Не нашли применения в ветеринарной практике вакцины, характеризуемые авторами как неагглютиногенные. Прежде всего сюда следует отнести вакцины из штаммов B. abortus 8 (В-8), испытанную П.Н. Жоваником на Украине и B. melitensis Невский-12, испытанную в Узбекистане и Киргизии (Абиджанов). Понятие неагглютиногенности завершается на этих 4-х вакцинных штаммах.

В последующем исследователи, представлявшие вакцины из диссоциированных штаммов бруцелл, характеризовали их как слабоагглютиногенные. Таковыми являлись штамм B. abortus 21 Рягузова, испытанный в Ростовской области, а также штаммы B. melitensis Н-13 и B. melitensis Н-14, синтезированные ВГНКИ и УзНИВИ в 1980-1990 гг. из штамма Невский-12.

3.3. Третий этап противоэпизоотических мероприятий.

Третий этап борьбы с бруцеллезом, которому посвящен наибольший объем исследований, приходится на годы разработки научно-обоснованной системы противобруцеллезных мероприятий на фоне широкого производственного испытания классического представителя вакцин из слабоагглютиногенного штамма B. abortus 82, выделенный К.М. Салмаковым в 1960 году из абортированного плода коровы со стабильным содержанием RS-SR-форм бруцелл. Обоснованием к проведению разработок в данном направлении явилась недостаточная изученность ряда вопросов, касающихся регламента применения вакцины.

Многочисленные сообщения ряда авторов в перспективности предлагаемых ими вакцин из диссоциированных штаммов бруцелл явились основанием к постановке государственного комиссионного опыта, организованного ГУВ МСХ СССР в 1971-1974 гг. на базе Дагестанского НИВИ. Вначале на лабораторных животных, а затем на крупном рогатом скоте были проверены основные свойства предлагаемых вакцинных штаммов под контролем эталонной вакцины из штамма 19 .

Результаты проведенных опытов позволили отдать предпочтение слабоагглютиногенному штамму B. abortus 82, который по иммуногенности не уступал эталонной вакцине из штамма 19, но был менее серопозитивен, что давало преимущество в последующей поствакцинальной диагностике. Результаты комиссионных опытов позволили рекомендовать данную вакцину к широкому производственному испытанию (1974 г). Анализ литературных данных позволил прийти к мнению о существовании только двух типов живых вакцин – классических из стабильных S-форм бруцелл (агглютиногенные) и из диссоциированных RS-SR-форм бруцелл (слабоагглютиногенные).

От бруцеллеза крупного рогатого скота оздоровлено большинство  ранее неблагополучных территорий Сибири со сложной эпизоотической обстановкой. Оздоровление хозяйств было обеспечено поддержанием в неблагополучных стадах перманентного иммунитета (за счет иммунизации телок 3-5 месячного возраста, реиммунизации телок перед осеменением, первотелок и далее коров  - с интервалом один-два года), поствакцинальной диагностикой и постепенным вытеснением неблагополучного поголовья благополучным иммунным поголовьем в сочетании с комплексом общих ветеринарно-санитарных, зоотехнических и организационно-хозяйственных мер. После  оздоровления неблагополучные районы переходили в разряд угрожаемых, где продолжалось использование вакцины из штамма 82 для иммунизации и реиммунизации телок, а также в большинстве случаев и коров с интервалом два года. Комплексный эпизоотологический анализ дает возможность обоснованно в последующем отказываться от вакцинации животных против бруцеллеза в  оздоровленных зонах ряда сибирских регионов, где угроза возникновения эндо- или экзоинфекции объективно исключена.

      4.  Эпизоотология бруцеллеза. Бруцеллез является типичным прямым зоонозом, т.е. передается от одного зараженного позвоночного хозяина (источник инфекции) к восприимчивому позвоночному хозяину. У отдельных видов животных (лошади, собаки, буйволы и др.) бруцеллез появляется спорадически, а крупного рогатого скота, овец, коз, свиней, северных оленей в виде энзоотий, а при определенных условиях  эпизоотий.     

       В природных условиях носительство бруцелл к началу 70-х годов было установлено у 24 видов диких животных и 18 видов кровососущих насекомых  (М.М. Ременцова, 1973). В настоящее время известно уже свыше 90 видов диких животных и насекомых, способных носить в организме бруцеллы (В.М. Авилов и др., 1997). Особое значение в циркуляции бруцелл в природе имеют синантропные и свободно живущие грызуны, в организме которых бруцеллы могут персистировать и выделяться месяцами. Для Br.neotomae пустынные кустарниковые крысы являются на территории США даже основным хозяином. В Дании, Германии и ряде других стран для бруцелл вида Br.suis основным природным резервуаром могут быть зайцы. Роль клещей в циркуляции бруцелл окончательно не выяснена, но уже определено, что эти бактерии могут в них не только длительное время сохраняться, но и передаваться трансвариально. Некоторые исследователи (И.Г.Галузо, М.М. Ременцова, 1960; Л.Н. Гудошник, 1962, и др.) считают, что клещи участвуют в передачи бруцелл из природной среды с/х животным, поддерживая тем самым существование эпизоотических очагов на животноводческих фермах.

      Важным моментом в быстром распространении бруцелл на больших географических территориях является их способность к так называемой миграции, т.е. к переносу от основного (типового) хозяина к дополнительному (нетиповому). Например, Br.melitensis  от овец и коз может передаваться крупному рогатому скоту, свиньям и многим другим видам животных, аналогично Br.abortus может передаваться и вызывать заболевание  овец, коз, собак и других животных. Если принято во внимание, что в нашей стране до 1996 г. циркулировало 4 (Br.melitensis, Br.abortus, Br.susi, Br.ovis.) из шести известных видов, то нетрудно представить возможность их существования на этой территории. К этому следует добавить, что сейчас из-за многочисленных международных связей резко повысилась степень риска заноса и распространения на территорию России и остальных двух видов возбудителей: Br.canis и Br.neotomae. По крайне мере, есть уже предварительные сведения (К.В. Шумилов с соавт., 1996; Л.В. Дегтяренко, Л.А. Гордиенко, В.Г. Ощепков, 1997) о завозе из США с больными бруцеллезом собаками вида Br.canis.

     Острая стадия эпизоотического процесса характеризуется, как правило, массовыми абортами и нарастанием количества реагирующего на бруцеллез скота. Больные животные в период абортов и даже нормальных отелов, окотов, опоросов выделяют с плодовыми оболочками, плодными водами, последом, послеродовыми истечениями огромное количество бруцелл. В результате происходит интенсивное обсеменение бруцеллами окружающих животных, кормов, кормушек, полов, предметов ухода, одежды обслуживающего персонала и других объектов внешней среды, которые являются факторами передачи возбудителя.

          Воротами проникновения бруцелл в организм являются слизистые оболочки ротовой полости, влагалища, коньюктива, поврежденная кожа. Определенную роль в заражение играют быки, бараны, хряки, передающие возбудителя со спермой.

          При замкнутом содержании стада (отары, группы) без пополнения новыми восприимчивыми животными острая стадия эпизоотического переходит в хроническую. Несмотря на многочисленные примеры самовыздоровления животных от бруцеллеза, часть переболевшего скота на длительное время остается бруцеллоносителями и представляет эпизоотическую опасность. Установлено бруцеллоносительство до 2-3 лет у овец и до 7-9 лет у коров. Именно поэтому попытки пополнения стад с давно угасшей инфекцией новыми , чаще молодыми животными нередко завершаются повторными вспышками бруцеллеза.

         Эпизоотология инфекционного эпидидимита баранов (ИЭБ), как самостоятельной инфекционной болезни имеет особенности в том, что основным источником инфекции является больной баран, а преимущественным путем передачи возбудителя является прямой половой контакт. Овцематки проявляют значительную устойчивость к этой инфекции.

     5. Патогенность бруцелл. Научные изыскания последних лет позволяют более углублённо и объёмно анализировать патогенез, клинические проявления, патогенность, вопросы специфической профилактики  бруцеллёза. Разные виды бруцелл неодинаково патогенны для человека и отдельных видов животных. Под патогенностью бруцелл понимается их способность вызывать  в организме животного или человека патологические процессы.

      Например, все три биовара вида B.melitensis являются высокопатогенными для человека, случаи и заболевания людей в результате заражения этим видом бруцелл могут приобретать эпидемический характер, тогда как возбудитель бруцеллеза крупного рогатого скота B.abortus  является умеренно патогенным для человека и наблюдается обычно спорадические случаи заболевания. Патогенность B.suis для человека зависит от принадлежности вида к тому или иному биовару. Так, биовары 1 и 2 (основной хозяин – свиньи), как и биовар 5 (основной хозяин – мыши и другие грызуны), являются высокопатогенные для человека. Вместе с тем биовар 4, являющийся возбудителем бруцеллеза северных оленей, обладает умеренной патогенностью. А вид B.canis (основной хозяин - собаки) является вообще низкопатогенным для человека, и клинические случаи заболевания  встречаются редко. Нет сообщений в отношении патогенности для людей видов B.neotomae, B.ovis и  B.suis биовар 2.