Аналитический контроль при производстве кремов для лица

Циклопептид-5 состоит из пяти аминокислот. RGD — одно- буквенный код для аминокислотной последовательности из аргинина (R), глицина (G) и аспарагиновой кислоты (D). D-Phe означает D-фенилаланин, АСНА — сокращенное название аминоциклогексанкарбоновой кислоты

 

     Структура циклопептида-5 отличается продуманностью, и каждая ее «часть» выполняет определенную функцию:

1) последовательность RGD по сути является «ключом» от рецептора интегринов;

2) D-фенилаланин повышает устойчивость молекулы к действию разрушающих ферментов; кроме того, ароматическое кольцо фенилаланина повышает лиганд-рецепторное взаимодействие (активность и селективность);

3) АСНА обеспечивает высокую растворимость циклопептида-5. 
 

АСНА  — сокращенное название аминоциклогексанкарбоновой кислоты, которая является искусственной  аминокислотой с симметричной структурой (в отличие от природных аминокислот, у нее нет стереоизомеров. [7] 
 

     Циклическая форма также способствует повышению  резистентности пептида к действию пептидаз. Возможно, это происходит вследствие резкого снижения способности пептида приобретать продольную гибкую конформацию, необходимую для его взаимодействия с каталитическими участками протеолитических ферментов. Кроме того, Окити и др. показали, что циклизация серий пептидов привела к улучшению их переноса через роговой слой.

     Более того, циклопептид-5 является первым циклическим пептидом, используемым в косметике, в котором все ковалентные связи между аминокислотами являются натуральными пептидными связями (= гомодетный белок).

     Циклопептид-5 является высокостабильной внутренней солью- это означает, что данной структуре не нужны противоионы и является интересным аспектом в отношении косметических рецептур.

     Данные in vitro

     Процесс старения кожи характеризуется истончением  эпидермиса, уменьшением плотности  кожи и сглаживанием дермо-эпидермального соединения (ДЭС). Типичные изменения ДЭС связаны с дисбалансом между синтезом и разрушением белковых волокон, формирующих базальную мембрану, и многочисленными функциональными и структурными изменения ее компонентов.

Данные in vitro (кДНК-чип), показывают, что циклопептид-5 активирует множество генов, связанных с регуляцией синтеза факторов роста и белков базальной мембраны. Как пример можно привести ламинин IV, коллаген IV, а также TGF(3i и TGFP3. Ламинин IV соединяется с рецепторами на поверхности клетки и, таким образом, прочно связывает базальную мембрану с прилежащим слоем клеток. Это обеспечивает стабилизацию клеточных структур. Коллаген IV является сетеобразующим типом коллагена. В дополнение циклопептид-5 подавляет гены, стимулирующие ферменты, такие как коллагегшза-3 и эластаза-А2, расщепляющие белки межклеточного матрикса (рис. 4).

Рис. 4

     

Экстрацеллюлярная часть (эктодомен) кристаллической структуры арз интегрина в комплексе с А) фибронектином с RGD-петлей в бирюзовом круге и Б) циклопептидом-5 в качестве имитатора RGD- петли фибронектина.

Определение грубости кожи методом  PRIMOS

Испытание проводилось  на 20 здоровых женщинах- добровольцах (в возрасте 37-63 лет) с нормальной кожей. Добровольцы не знали, используют ли они тестируемый препарат (эмульсия с 4% циклопептидом-5) или эмульсию- плацебо (без циклопептида-5). За неделю до начала эксперимента они перестали пользоваться какими-либо топическими препаратами на тех участках кожи, на которые планировалось нанесение тестируемых средств.

     На  период эксперимента для очищения кожи можно было пользоваться только водой  и мягкими моющими средствами. Проба на совместимость тестируемого продукта проводилась до начала исследования его эффективности. Все добровольцы должны были дать письменное согласие на участие в исследовании. [7]

     Препарат  в объеме 2 мг/см² наносили дважды в день на внутреннюю поверхность одного предплечья в течение 28 дней. Другое предплечье служило контролем, Оценку микрорельефа проводили методом трехмерною анализа поверхностей PRIMOS до начала эксперимент (нулевой день), на 14-й и 28-й дни. В качестве количественного критерия использовали параметр Rz (характеризует среднюю глубину морщин). Результаты, полученные путем статистической обработки данных, представлены на рис.5.

     В клиническом исследовании, основанном на PRIMOS, было зафиксировано ощутимое повышение гладкости кожи через 4 недели от начала применения.

     Рис.5. Эффект разглаживания кожи после местного нанесения циклопептида-5. Шероховатость кожи была оценена методом PRIMOS через 14 и 28 дней после нанесений тестового продукта: 1 — эмульсия- плацебо; 2 — эмульсия с 4% циклопептидом-5. 

     Арсенал разработчиков недавно пополнился интересным ингредиентом, относящимся к категории пептидов-биомиметиков. Циклопептид-5 — небольшое синтетическое соединение, имеющее в своем составе аминокислотную последовательность Arg-Gly-Asp (RGD), благодаря которой он способен связываться с интегриновыми рецепторами и передавать сигналы клеткам, в том числе стимулировать синтез важных компонентов меж клеточного матрикса.

     Уникальная  структура циклопептида-5 определяет его высокую селективность —  он способен имитировать естественные процессы взаимодействий и восстановления в коже. Кроме того, он устойчив к разрушению и способен проходить сквозь барьерные структуры кожи.

     Клинические и лабораторные исследования подтвердили его эффективность и безопасность. Циклопептид-5 соответствует концепции физиологической косметологии и способствует естественному восстановлению кожи.

 Новая область  в науке, затрагивающая все новые и новые открытия во всех отраслях промышленности – нанотехнология  не обделила и косметическое производство. Ученые различных стран  утверждают что нанотехнология – технология будущего. [7]

  Наночастицы

«Нано» (миллиардная  доля, греч.) в применении к описываемым объектам подразумевает, что их размеры находятся в пределах 1-1000 нм (10^-9 м), что соответствует уровням биологической организации от атомарного до субклеточного. Таким образом, под определение наночастицы вообще-то попадают практически любые супрамолекулярные комплексы. Однако, по уже сложившейся традиции в биологической и медицинской литературе, под наночастицами обычно подразумевают вполне конкретные (и прежде всего искусственно созданные) молекулярные конструкции. Их можно условно разделить на несколько классов (рис.6 ) 

Рис. 6

Наначастицы используемые в доставке необходимых компонентов и молекул: 1) липосома и аденовирус; 2) полимерная наноструктура; 3) дендример; 4) углеродная нонотрубка. 
 

  Использование наночастиц в медицине и косметике  позволит не только эффективно доставлять биологически активые молекулы сквозь различные барьеры организма (кожный, гематоэнцефалический), которые они они не способны преодолевать самостоятельно, но и существенно изменять характер воздействия препарата. Например, трансдермальная доставка позволяет избежать нежелательных побочных эффектов, снизить эффективную дозу препарата за счет существенного увеличения локальной концентрации. [8]

       Методики доставки препаратов  на основе наночастиц существенно  сдвигают представления о возможностях кожной терапии. С одной стороны, это обеспечивает заметный прогресс в области медицины (в частности, дерматологии), с другой стороны, позволяет косметическим препаратам выйти на качественно новый уровень. Действительно, от нанокосметики будущего стоит ожидать, что в основе ее действия будет лежать не маскировка нежелательных эффектов, как зачастую это происходит на сегодняшний момент, а устранение их биологической причины.

     В то же время дебаты о целесообразности использования наночастиц в продуктах повседневного потребления, таких как косметика, сегодня только разгораются. Основные их тезисы таковы - нет убедительных доказательств ни наличия риска, ни его отсутствия. Представители косметической индустрии опираются на отсутствие данных о проблемах и, исходя из этого, утверждают, что продукты, содержащие наночастицы, совершенно безопасны. Союзы потребителей и организации здравоохранения и защиты окружающей среды настаивают на том, что необходимо продолжать заниматься изучением этого вопроса, так как мы еще слишком мало знаем о возможных последствиях и побочных эффектах.

  Научный комитет ЕС по потребительским товарам  рассмотрел оценку безопасности наноматериалов для применения в косметических  продуктах, а так же обсудил необходимость  тестирования на животных.

  На сегодняшний  день косметические препараты с  использованием наночастиц проходят множество исследований и испытаний. [8] 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 

Патенты 
 

 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 

Стандартизированные методы исследования

 
ГОСТ Р 51962—2002 Продукты пищевые и продовольственное  сырье.

   Характеристики

      Косметические кремы представляют собой смесь  синтетических и натуральных  продуктов: жиров, воска, масел, настоев  или экстрактов лекарственных трав, витаминов, красителей, антиоксидантов, консервантов, отдушек и других добавок, обеспечивающих потребительские свойства кремов и разрешенных к применению в установленном порядке.

      Косметические кремы должны вырабатывать в соответствии с требованиями настоящего стандарта  по рецептурам, техническим требованиям  и технологическим регламентам (инструкциям) при соблюдении санитарных норм и правил, утвержденных в установленном порядке.

      По  органолептичесхим и физико-химическим показателям косметические кремы  должны соответствовать требованиям  и нормам, указанным в таблице 1. Значение показателей на конкретное изделие должно быть приведено в техническом требовании.

Таблица 4