Автор работы: Пользователь скрыл имя, 23 Ноября 2012 в 11:28, курсовая работа
Действуя на растительный организм, неблагоприятные факторы среды вызывают в нем разнообразные ответные реакции. Многие из них, к которым растение эволюционно не приспособлено, могут оказывать стрессовое воздействие на организм, приводящее к различным физико-химическим аномалиям, повреждению их структур и метаболических функций . К одним из наиболее значимых факторов, определяющих географическое распространение и продуктивность растений, относится температура. Действие низких температур, вымерзание посевов и насаждений наносят сельскому хозяйству большой ущерб, что усугубляется снижением урожайности тех растений, которые выживают. Все они подвергаются воздействию пониженных температур различной длительности, причем из них только пшеница обладает относительно высокой степенью устойчивости к низким температурам . В силу этого внимание ученых все больше концентрируется на изучении механизмов толерантности и адаптации высших растений к гипотермии. На основании ряда исследований выдвинуто несколько теорий, объясняющих механизм повреждений от мороза, а также устойчивость и адаптацию некоторых видов к отрицательным температурам, тогда как устойчивость группы холодостойких растений к низким положительным температурам изучена гораздо меньше. По этой причине исследованиям физиологических и молекулярных основ холодостойкости следует уделить больше внимания.
2.2.5.2 Определение активности каталазы.
Активность каталазы определяли колориметрическим методом. Принцип метода основан на способности пероксида водорода образовывать с солями молибдена стойкий окрашенный комплекс. В опыте использовались холостая, контрольная и опытная пробы.
Схема опыта:
хол |
кон |
опыт | ||
Трис-HCl 1мл |
Трис-HCl 1мл |
Трис-HCl 1мл | ||
0,03% Н2О2 2мл |
Н2О 2мл |
0,03% Н2О2 2мл | ||
- |
0,1 мл экстракта |
0,1 мл экстракта | ||
10 минут | ||||
1мл 4% (NH4)2MoO4 |
1мл 4% (NH4)2Mo O4 |
1мл 4% (NH4)2Mo O4 | ||
0,1мл экстракта |
- |
- |
Интенсивность окраски в каждой пробе измеряли на ФЭКе при длине волны 410 нм против контрольной пробы.
Активность каталазы рассчитывали по формуле:
Е=(Ахол – Аоп) * V*t*K
Е – активность каталазы (мкат/мл);
Ахол и Аоп- экстинция холостой и опытной проб;
V- объем вносимой пробы, 0,1мл;
t- время инкубации, 10 мин;
К- коэффициент миллимолярной
2.2.5.3 Создание стресса и определение активности.