Необов’язкові компоненти структури бактеріальної клітини: спори, капсули, включення. Методи фарбування для їх виявлення

      За наявності поверхневих CD маркерів лімфоцити поділяють на функціонально різні популяції і субпопуляції, перш за все на Т-(тімусзавісімие, що пройшли первинну диференціювання в тимусі) лімфоцити і В - (bursa-залежні, що пройшли дозрівання в сумці Фабриціуса у птахів або його аналоги у ссавців) лімфоцити.

    Т-лімфоцити.

    Локалізація.

      Зазвичай локалізуються в так  званих Т-залежних зонах периферичних  лімфоїдних органів (періартикулярно  у білій пульпі селезінки і  паракортикальній зонах лімфовузлів).

    Опції.

      Т-лімфоцити розпізнають процессірованний і представлений на поверхні антиген-представляють (А) клітин антиген. Вони відповідають за клітинний імунітет, імунні реакції клітинного типу. Окремі субпопуляції допомагають В-лімфоцитів реагувати на Т-залежні антигени виробленням антитіл.

    Походження  і дозрівання.

      Родоначальницею всіх клітин  крові, в тому числі лімфоцитів, є єдина стовбурова клітина  кісткового мозку. Вона генерує  два типи клітин-попередників-лімфоїдну  стволову клітку і попередника  клітин червоної крові, від  якої походять і клітини-попередники лейкоцитів і макрофагів.

      Освіта і дозрівання імунокомпетентних  клітин здійснюється в центральних  органах імунітету (для Т-лімфоцитів-в  тимусі). Клітини-попередники Т-лімфоцитів  потрапляють в тимус, де пре-Т-клітини  (тимоцити) дозрівають, проліферують і проходять диференціювання на окремі субкласи в результаті взаємодії з епітеліальними і дендритними клітинами строми і впливу гормоноподібних поліпептидних факторів, секретується епітеліальними клітинами тимусу (альфа1- тимозин, тімопоетіна, тимуліну та ін.)

      При диференціюванні Т-лімфоцити  набувають певний набір мембранних CD - маркерів. Т-клітини поділяють  на субпопуляції відповідно до  їх функцією і профілем CD-маркерів.

      Т-лімфоцити розпізнають антигени  за допомогою двох типів мембранних глікопротеїнів-Т-клітинних рецепторів (сімейство Ig-подібних молекул) і CD 3, нековалентно пов'язаних між собою. Їх рецептори, на відміну від антитіл і рецепторів В-лімфоцитів, не розпізнають вільно циркулюють антигени. Вони розпізнають пептидні фрагменти, які подаються нею А-клітинами через комплекс чужорідних речовин з відповідним білком головної системи гістосумісності 1 і 2 класу.

    Виділяють три основні групи Т-лімфоцитів-помічники (активатори), ефектори, регулятори.

    Перша група-помічники (активатори), до складу яких входять Т-хелпери1, Т-хелпери2, індуктори Т-хелперів, індуктори Т-супресорів.

    1. Т-хелпери1 несуть рецептори CD4 (як і Т-хелпери2) і CD44, відповідають  за дозрівання Т-цитотоксичних  лімфоцитів (Т-кілерів), активують Т-хелпери2  і цитотоксичну функцію макрофагів, секретують ІЛ-2, ІЛ-3 та інші цитокіни.

    2. Т-хелпери2 мають загальний для  хелперів CD4 і специфічний CD28 рецептори,  забезпечують проліферацію і  диференціювання В-лімфоцитів в  антітелпродуцірующіе (плазматичні)  клітини, синтез антитіл, гальмують функцію Т-хелперов1, секретують ІЛ-4, ІЛ-5 та ІЛ-6.

    3. Індуктори Т-хелперів несуть CD29, відповідають за експресію антигенів  HLA класу 2 на макрофагах і інших  А-клітинах.

    4. Індуктори Т-супресорів несуть CD45 специфічний рецептор, відповідають за секрецію ІЛ-1 макрофагами, активацію диференціювання попередників Т-супресорів.

    Друга група-Т-ефектори. У неї входить  тільки одна субпопуляція.

     5. Т-цитотоксичні лімфоцити (Т-кілери). Мають специфічний рецептор CD8, лізують  клітини-мішені, що несуть чужорідні антигени або змінені аутоантигени (трансплантат, пухлина, вірус та ін.) ЦТЛ розпізнають чужорідний епітопи вірусного або пухлинного антигену в комплексі з молекулою класу 1 HLA в плазматичної мембрани клітини-мішені.

    Третя група-Т-клітини-регулятори. Представлена ​​двома основними субпопуляціями.

     6. Т-супресори мають важливе значення  в регуляції імунітету, забезпечуючи  придушення функцій Т-хелперів 1 і 2, В-лімфоцитів. Мають рецептори  CD11, CD8. Група функціонально різнорідна. Їх активація відбувається внаслідок безпосередньої стимуляції антигеном без істотної участі головної системи гістосумісності.

     7. Т-контсупрессори. Не мають CD4, CD8, мають рецептор до особливого  Лейкин. Сприяють придушення функцій  Т-супресорів, виробляють резистентність Т-хелперів до ефекту Т-супресорів.

    В-лімфоцити.

      Існує кілька підтипів В-лімфоцитів. Основна функція В-клітин-Ефекторна  участь у гуморальних імунних  реакціях, диференціація в результаті  антигенної стимуляції у плазматичні  клітини, що продукують антитіла.

    Освіта  В-клітин у плода відбувається в  печінці, надалі-в кістковому мозку.  Процес дозрівання В-клітин здійснюється у дві стадії-антиген - незалежну  і антиген - залежну.

    Антиген-незалежна  фаза. По-лімфоцит в процесі дозрівання проходить стадію пре-В-лімфоцита-активно пролиферирующей клітини, що має цітоплазменние H-ланцюга типу C мю (тобто IgM). Наступна стадія-незрілий По-лімфоцит характеризується появою мембранного (рецепторного) IgM на поверхні. Кінцева стадія антігеннезавісімой диференціювання-освіта зрілого По-лімфоцита, який може мати два мембранних рецептора з однаковою антигенної специфічністю (ізотип) - IgM і IgD. Зрілі В-лімфоцити покидають кістковий мозок і заселяють селезінку, лімфовузли і інші скупчення лімфоїдної тканини, де їх розвиток затримується до зустрічі зі "своїм" антигеном, тобто до здійснення антиген-залежною диференціювання.

    Антиген-залежна  диференціювання включає активацію, проліферацію і диференціювання  В-клітин в плазматичні клітини  і В-клітини пам'яті. Активація  здійснюється різними шляхами, що залежить від властивостей антигенів та участі інших клітин (макрофагів, Т-хелперів). Більшість антигенів, індукують синтез антитіл, для індукції імунної відповіді вимагають участі Т-клітин-тимус-залежні пнтігени. Тимус-незалежні антигени (ЛПС, високомолекулярні синтетичні полімери) здатні стимулювати синтез антитіл без допомоги Т-лімфоцитів.

      По-лімфоцит з допомогою своїх  іммуноглобулінових рецепторів  розпізнає і пов'язує антиген.  Одночасно з В-кліткою антиген  за поданням макрофага розпізнається Т-хелперів (Т-хелперів 2), який активується і починає синтезувати фактори росту і диференціювання. Активоване цими факторами По-лімфоцит зазнає ряд поділок і одночасно диференціюється в плазматичні клітини, що продукують антитіла.

      Шляхи активації В-клітин і кооперації клітин в імунній відповіді на різні антигени і з участю популяцій мають і не мають антиген Lyb5 популяцій В-клітин відрізняються. Активація В-лімфоцитів може здійснюватися:

     - Т-залежним антигеном за участю  білків МНС класу 2 Т-хелпери;

     - Т-незалежним антигеном, що мають  в складі мітогенний компоненти;

     - Поліклональних активатором (ЛПС);

     - Анти-мю імуноглобулінами;

     - Т-незалежним антигеном, що не  мають мітогеном компонента.

    Кооперація  клітин в імунній відповіді.

      У формуванні імунної відповіді  включаються всі ланки імунної  системи-системи макрофагів, Т-і  В-лімфоцитів, комплементу, інтерферонів  і головна система гістосумісності. 

      У стислому вигляді можна виділити  наступні етапи. 

     1. Поглинання і процесинг антигену макрофагом.

     2. Представлення процессірованного  антигену макрофагом з допомогою  білка головної системи гістосумісності  класу 2 Т-хелперів.

     3. Пізнавання антигену Т-хелперами  і їх активація. 

     4. Пізнавання антигену і активація  В-лімфоцитів.

     5. Диференціація В-лімфоцитів у плазматичні клітини, синтез антитіл.

     6. Взаємодія антитіл з антигеном,  активація систем комплементу  і макрофагів, інтерферонів.

     7. Вистава за участю білків МНС  класу 1 чужорідних антигенів  Т-кілерів руйнування інфікованих  чужорідними антигенами клітин Т-кілерами.

     8.  Індукція Т-і В-клітин імунної  пам'яті, здатних специфічно розпізнавати  антиген і брати участь у  вторинному імунній відповіді  (антігенстімулірованние лімфоцити).

    Клітини імунної пам'яті. Підтримання довгоживучих і метаболічно малоактивних клітин пам'яті, рециркулює в організмі, є основою тривалого збереження набутого імунітету. Стан імунної пам'яті обумовлено не тільки тривалістю життя Т-і В-клітин пам'яті, але і їх антигенною стимуляцією. Тривале збереження антигенів в організмі забезпечується дендритними клітинами (депо антигенів), що зберігають їх на своїй поверхні.

    Дендритні клітини - популяції отросчатих клітин лімфоїдної тканини кістковомозкового (моноцитарного) генезу, що представляє  антигенні пептиди Т-лімфоцитів і зберігає антигени на своїй поверхні. До них відносяться фолікулярні отросчатие клітини лімфовузлів і селезінки, клітини Лангерханса шкіри та дихальних шляхів, М-клітини лімфатичних фолікулів травного тракту, дендритні епітеліальні клітини тимуса.

    CD антигени.

      Кластерна диференціація поверхневих  молекул (антигенів) клітин, перш  за все лейкоцитів, крокує далеко  вперед. До теперішнього часу CD антигени-не  абстрактні маркери, а функціонально  значущі для клітини рецептори,  домени і детермінанти, в тому числі початково не є специфічними для лейкоцитів.

      Найважливішими диференційовані  антигенами Т-лімфоцитів людини  є наступні.

     1. CD2 - антиген, характерний для Т-лімфоцитів, тимоцитів, NK клітин.  Він ідентичний  рецептора еритроцитів барана  і забезпечує утворення розеток з ними (методика визначення Т-клітин).

     2. CD3 - необхідні для функціонування  будь-яких Т-клітинних рецепторів (ТКР). Молекули CD3 мають всі субкласи  Т-лімфоцитів. Взаємодія ТКР-CD3 (вона  складається з 5 субодиниць) з  представляє антиген молекулою МНС класу 1 або 2 визначає характер і реалізацію імунної відповіді.

     3. CD4. Ці рецептори мають Т-хелпери  1 і 2 та Т-індуктори. Є корецептора  (місцем зв'язування) детермінант  білкових молекул МНС класу  2. Є специфічним рецептором для  оболонкових білків вірусу імунодефіциту  людини ВІЛ-1 (gp120) і ВІЛ-2.

     4. CD8.  Популяція CD8 + Т-лімфоцитів включає цитотоксичні та супресорної клітини. При контакті з клітиною-мішенню CD8 виступає в ролі корецептора для білків HLA класу 1.

    Диференційовані рецептори В-лімфоцитів.

      На поверхні В-лімфоцитів може  знаходитися до 150 тисяч рецепторів, серед яких описано понад 40 типів з різними функціями. Серед них - рецептори до Fc-компоненту імуноглобулінів, до С3 компоненту комплементу, антигенспецифической Ig рецептори, рецептори до різних факторів росту і диференціювання.

    Коротка характеристика методів оцінки Т-і В-лімфоцитів.

      Для виявлення В-лімфоцитів використовують  метод розеткоутворення з еритроцитами, обробленими антитілами і комплементом (EAC-РОК), спонтанного розеткоутворення  з еритроцитами миші, метод флуоресцентних  антитіл з моноклональними антитілами (МКА) до рецепторів В-клітин (CD78, CD79a, b, мембранні Ig ).

      Для кількісної оцінки Т-лімфоцитів  використовують метод спонтанного  розеткоутворення з еритроцитами  барана (Е-РОК), для виявлення субпопуляцій (наприклад, Т-хелперів і Т-супресорів) - імунофлюоресцентний метод з МКА до CD рецепторів, для визначення Т-кілерів-тести цитотоксичності .

      Функціональну активність Т-і  В-клітин можна оцінити в реакції  бласттрансформації лімфоцитів (РБТЛ) на різні Т-і В-мітогени.

      Сенсибілізовані Т-лімфоцити, що беруть участь в реакціях гіперчутливості сповільненого типу (ГСТ) можна визначити по виділенню одного з цитокінів - MIF (міграцію інгібуючого фактора) в реакції гальмування міграції лейкоцитів (лімфоцитів) - РГМЛ. Докладніше про методи оцінки імунної системи-в лекціях з клінічної імунології.