Хромосомные и генные болезни

Хромосомные и генные болезни  

     Это группа болезней, в основе развития которых лежат нарушения числа  или структуры хромосом, возникающие  в гаметах родителей или на ранних стадиях дробления зиготы. История изучения Х.б. берет начало с кинических исследований, проводившихся задолго до описания хромосом человека и открытия хромосомных аномалий. Х.б. - болезнь Дауна (трисомия 21) , синдромы: Тернера (трисомия 18), Клайнфелтера, Патау (трисомия 13), Эдвардса.

     С разработкой метода авторадиографии  стала возможной идентификация некоторых индивидуальных хромосом, что способствовало открытию группы Х.б., связанных со структурными перестройками хромосом. Интенсивное развитие учения о Х.б. началось в 70х годах 20 в. после разработки методов дифференциального окрашивания хромосом.

     Классификация Х.б. основана на типах мутаций вовлеченных  в них хромосом. Мутации в половых  клетках приводят к развитию полных форм Х.б., при которых все клетки организма имеют одну и ту же хромосомную  аномалию.  
В наст. Время описано 2 варианта нарушений числа хромосомных наборов - тетраплоидия и триплодия. Другая группа синдромов обусловлена нарушениями числа отдельных хромосом трисомиями (когда имеется добавочная хромосома в диплоидном наборе) или моносомия (одна из хромосом отсутствует).Моносомии аутосом несовместимы с жизнью . Трисомии - более часто встречающаяся паталогия у человека . Ряд хромосомных болезней связан с нарушением числа половых хромосом.

     Самая многочисленная группа Х.б.- это синдромы, обусловленные структурными перестройками  хромосом. Выделяют хромосомные синдромы так называемых частичных моносомий (увеличение или уменьшение числа отдельных хромосом не на целую хромосому, а на ее часть).

     В связи с тем, что подавляющая  часть хромосомных аномалий относится  к категории летальных мутаций, для характеристики их количественных параметров используются 2 показателя - частота распространениея и частота возникновения.  
Выяснено, что около 170 из 1000 эмбрионов и плодов погибают до рождения, из них около 40% - вследствие влияния хромосомных нарушений. Тем не менее, значительная часть мутантов (носителей хромосомной аномалии) минует действие внутриутробного отбора .

     Но  некоторые из них погибают в раннем детстве. Больные с аномалиями половых хромосом из - за нарушений полового развития , как правило, не оставляют потомства. Отсюда следует - все аномалии можно отнести к мутациям. Показано ,что в общем случае хромосомные мутации почти полностью изчезают из популяции через 15 - 17 поколений .  
Для всех форм Х.б. общим признаком является множественность нарушений (врожденные пороки развития). Общими проявлениями Х.б. являются: задержка физического и психомоторного развития, умственная отсталость, костно-мышечные аномалии, пороки сердечно - сосудистой, мочеполовой, нервной и др. систем, отклонение в гормональном, биохимическом и иммунологическом статусе и др.

     Степень поражения органов при Х.б. зависит  от многих факторов - типа хромосомной  аномалии, недостающего или избыточного материала индивидуальной хромосомы, генотипа организма, условий среды, в котором развивается организм.  
Этиологическое лечение Х.б. в настоящее время не разработано.  
Разработка методов пренатальной диагностики делает этот подход эффективным в борьбе не только с хромосомными, но и с др. наследственными болезнями.  
Кнастоящему времени на хромосомах человека картировано около 800генов, мутации которых приводят к различным наследственным заболеваниям. Количество моногенных заболеваний, для которых известна локализация контролирующего гена, еще больше и приближается к 950за счет существования аллельных серий, то есть групп болезней, клинически сильно отличающихся друг от друга, но обусловленных мутациями в одном и том же гене . Для всех этих заболеваний принципиально возможна пренатальная диагностика с использованием косвенных методов молекулярного анализа .  
Более половины картированных генов клонировано и охарактеризовано методами молекулярного анализа. Для каждого из этих генов описаны мутантные варианты среди соответствующих групп больных, причем количество идентифицированных аллелей в разных генах может колебаться от одного до нескольких сотен (см.ниже). Молекулярное генотипирование мутации позволяет проводить прямую пренатальную диагностику соответствующего наследственного заболевания в семьях высокого риска.  
Другое положение, которое следует напомнить в вводной части этой главы касается специфичности мутационных повреждений каждого структурного гена. Несмотря на наличие общих закономерностей в мутационных процессах, спектр мутаций для каждого гена, равно как и сами структурные геныуникальны. Причины этой уникальности кроются в особенностях первичной структуры ДНК каждого гена, в частности, обогащенности CG нуклеотидами, его размерах, наличии прямых и обращенных повторов, присутствии внутри гена ДНК последовательностей, гомологичных внегенным участкам, что может приводть к нарушениям процессов рекомбинации в мейозеи.т.д.

     Для каждого идентифицированного гена, мутации которого приводят к наследственным заболеваниям, разработаны эффективные методы молекулярной диагностики, как правило, направленные на генотипирование наиболее частых мутаций этого гена. Реже для этих же целей используется непрямой метод диагностики с помощью молекулярных маркеров.

     Примеры болезней

       Адрено-генитальный синдром. Адрено-генитальный синдром(врожденный дефицит 21гидроксилазы) достаточно распространенное аутосомно-рецессивное заболевание. Частота "классических"форм 1:10000новоржденных, "неклассической"около 1% в популяции. Взависимости от характера нарушения функции гена и, соответственно клинических проявлений "классическая форма"подразделляется на два варианта: 1. летальная сольтеряющая форма; 2. нелетальнаявирилизирующая форма, связанная c избытком андрогенов (Morel, Miller, 1991).

     Влокусе 6р21.3, внутри сложного супергенетического комплекса HLA идентифицированы два  тандемно расположенных 21гидроксилазных генафункционально активный CYP21B и  псвдогенCYP21А, неактивный вследствие делеции  в 3м экзоне, инсерции со сдвигом рамки считывания в 7м экзоне и нонсенс мутацийв 8м экзоне. Ген и псевдоген разделены смысловой последовательностью гена С4В, кодирующей 4й фактор комплемента. Оба гена состоят из 10экзонов, имеют длину 3,4кб и отличаются только по 87нуклеотидам. Высокая степень гомологии и тандемное расположение указвают на общность эволюционного происхождения этих генов. Любопытно отметить, что такие же тандемно расположенные гены 21гидроксилазы (называемые также Р450с21) обнаружены и у других млекопитающих, причем у мышей, в отличие от человека, активен только ген CYP21A, но не CYP21B, тогда как у крупного рогатого скота функционально активны оба гена.  
Белок- 21гидроксилаза ( Р450с21- микросомальный цитохром 450) обеспечивает превращение 17гидроксипрогестерона в 11дезоксикортизол и прогестеронав дезоксикортикостерон. Впервом случае возникает дефицит глюкокортикоидов и, прежде всего, кортизола, что в свою очередь стимулирует синтез АКТГ, и ведет к гиперплазии коры надпочечников (вирилирующая форма). Нарушение превращения прогестерона в дезоксипрогестерон ведет к дефициту альдостерона, что в свою очередь нарушает способность почек удерживать ионы натрия и приводит к быстрой потере соли плазмой крови (соль теряющая форма).

     Как и в случае гемофилии А,наличие  рядом с кодирующим геном гомологичной ДНК последовательности зачастую ведет к нарушениям спаривания в мейозе и, как следствие этого, к конверсии генов (перемещения фрагмента активного гена на псевдоген), либо к делеции части смыслового гена. Вобоих случаях функция активного гена нарушается. Надолю делеций приходится около 40% мутаций, на долю конверсий20% и примерно 25% составляют точечные мутации. Согласно отечественным данным в случае наиболее тяжелой сольтеряющей формы АГС, на долю конверсий приходится более 20% мутантных хромосом, на долю делецийоколо 10% (Evgrafov et al., 1995).

     Непрямая  диагностика АГС возможна с помощью  типирования тесно сцепленных с  геном CYP21B аллелей HLA A и HLA B генов, а  также алелей гена HLA DQA1. Прямая ДНК  диагностика АГС основана на амплификакции с помощью ПЦР отдельных фрагментов генов CYP21B и CYP21A, их рестрикции эндонуклеазами HaeIII или RsaI и анализе полученных фрагментов после электрофореза (Evgrafov et al., 1995).  
Спинальная мышечная атрофия.

     Спинальная  мышечная атрофия (СМА) аутосомно-рецессивное заболевание, характеризуется поражением моторных нейронов передних рогов спинного мозга, в результате чего развиваются симметричные параличи конечностей и мышц туловища. Этовторое после муковисцидоза наиболее частое летальное моногенное заболевание (частота 1: 6000новорожденных).

     СМА подразделяется на три клинические  формы. ТипI. Острая форма (болезнь Верднига-Гоффмана), проявляется в первые 6месяцев  жизни и приводит к смерти уже  в первые два года; Тип II. Средняя (промежуточная) форма, пациенты не могут стоять, но обычно живут более 4х лет; Тип III. Ювенильная форма (болезнь Кугельберга-Веландера) прогрессирующая мышечная слабость после 2х лет. Все три формы представляют собой аллельные варианты мутаций одного гена SMN (survival motor neurons), картированного в локусе D5S125(5q13) и идентифицированного методом позиционного клонирования (см.Главу III) в 1995г (Lefebvre et al. 1995). Вэтой пока единственой работе показано, что ген SMN размером всего 20000п.о.состоит из 8 экзонов. мРНК этого гена содержит 1700п.о. и кодирует ранее неизвестный белок из 294 аминокислотных остатков с молекулярным весом 32КилоДальтона.

     Ген дуплицирован. Его копия (возможно вариант  псевдогена) располагается несколько  ближе к центромере и отличается от гена SMN наличием 5и точечных мутаций, позволяющих отличить оба гена путем амплификации экзонов 7и 8и их исследованием методом SSCP анализа (см.Главу IV). Ген назван сBCD541, по аналогии с первоначальным вариантом названия для теломерной копии,то есть гена SMN, tBCD541. Ген cBCD541экспрессируется, но в отличие от гена SMN его сДНК подвергается альтернативному сплайсингу с утратой экзона 7. Отсутствие гена SMN (tBCD541) у 93% больных (213из 229), его разорванная (interrupted) структура у 13обследованных пациентов (5.6%) и наличие серьезных мутаций у оставшихся 3х больных дали основание именно данную теломерную копию гена считать ответственной за заболевание.

     Существенно отметить, что центромерная копия  гена обнаружена у 95.5% больных, тогда  как отсутствует она только у 4,4% пациентов. Внепосредственной близости от теломерного конца гена SMN идентифицирован еще один генген белка-ингибитора запрогаммированной гибели нейронов (neuronal apoptosis inhibitory protein -NAIP). При тяжелых клинических формах СМА (Тип I), обусловленных делециями, по-видимому, нередко происходит утрата гена NAIP. Согласно гипотезе авторов СМА возникает при гомозиготном состоянии мутаций (обычно-делеций) в гене SMN, при этом различия между формами СМА определяются двумя основными факторами: 1. числом копий гена cBCD541(двев случае Типа I и четыре (возникающих вследствие конверсии между SMN и cBCD541) в случае Типа III), 2. наличием или отсутствием гена NAIP.Среди всех обследованных СМА-больных не обнаружены случаи одновременной делеции обоих гомологичных генов - SMN (tBCD541) и сBCD541,что указывает, по мнению авторов,на то, что такая аберрация должна проявляться как доминантная леталь еще в эмбриогенезе.  
 
 
                                                     СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ  

     Н. Бочков "Гены и судьбы".

     Л. А. Лещинский "Берегите здоровье"

     Г. И. Куценко, Ю.В. Новиков "Книга о здоровом образе жизни"

     В. И. Воробьев "Слагаемые здоровья"

     Н. Б. Коростелев "От А до Я"

     И. П. Березин, Ю. В. Дергачев "Школа здоровья"